CRISPR作為一項新興的基因編輯技術，自發現以來，因其簡單經濟、特異性高的優勢在許多領域得到廣泛的應用。CRISPR/Cas9是通過人工設計的 sgRNA來識別目的基因組序列，并引導 Cas9 蛋白酶進行有效切割 DNA雙鏈，已經廣泛應用于拮抗DNA病毒和逆轉錄病毒研究和應用中。隨后研究人員鑒定發現了Cas13a具有RNA介導的RNA酶切活性，后續研究發現CRISPR/Cas13a能夠在哺乳動物細胞中“工作”，即特異性地下調內源性和報告RNAs的水平。以往研究對于Cas13a抑制某些植物RNA病毒已有報道，但是Cas13a是否在哺乳動物細胞內抑制人類病毒的研究未見報道。

郭斐課題組在詳細研究利用CRISPR/Cas9的DNA剪切活性抑制HIV復制周期中的具體作用的基礎上（Hum Gene Ther. 2018），繼續探討研究了CRISPR/Cas13a靶向HIV RNA，抑制HIV復制的作用機制。研究結果題為CRISPR/Cas13a inhibits HIV-1 infection的論文于2020年6月發表在Molecular Therapy - Nucleic Acids雜志，，論文中利用來自Leptotrichia buccalis的LbuCas13a，針對HIV保守序列設計了一系列crRNA，結果證實了LbuCas13a具有抑制HIV在細胞體內復制的功能，LbuCas13a發揮抗病毒作用在HIV生活周期的各個階段，其不僅可以直接剪切侵入的HIV基因組RNA，還可以對HIV轉錄的mRNA和新生成的基因組RNA進行剪切。這些研究結果為阻止HIV感染提出新的思路，為HIV感染疾病的預防和治療提供重要研究參考。研究結果證實了Cas13a在哺乳動物細胞中能夠對病毒基因組RNA和病毒轉錄mRNA進行剪切，有望繼續擴大CRISPR/Cas13a的應用范圍。

圖. CRISPR/Cas13a作用于HIV生活周期各個步驟

以上研究工作得到了國家科技重大專項、國家重點研發計劃和中國醫學科學院醫學與健康科技創新工程等項目的資助。